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Separazione del campione

Parametri elettroforesi per gel di

poliacrilammide discontinui

I gel possono essere eseguiti sia in costante

impostazioni correnti o tensione costante. Una

impostazione corrente costante è tradizional-

mente utilizzato con un sistema tampone dis-

continuo modo che la velocità di migrazione

elettroforetica rimane invariato per tutta la

corsa. In queste condizioni, all’aumentare della

tensione man mano che procede di esecuzione.

Un valore minore di corrente è raccomandata

per una maggiore risoluzione. Il livello ottimale

di corrente deve essere determinato empirica-

mente, i principali fattori che devono essere

equilibrato includere la concentrazione di gel

e la velocità di migrazione, e il riscaldamento

Joule risultante e distorsione banda. Tabella 2

elenca punto di partenza le linee guida e le rego-

lazioni per lo spessore del gel, il numero di gel, e

il tasso di migrazione.

Corrente

Attuali agisce sul totale sezione trasversale di tutti i

gel perché i gel sono collegate in parallelo al circuito

elettrico. Così l’impostazione corrente per un gel deve

essere moltiplicato per il numero di gel dello spessore

stesso gel che vengono eseguiti contemporaneamente.

Per un gel 1,5 millimetri di spessore, si consiglia

l’impostazione corrente di avviamento di 25 mA. (Due

da 1,5 mm gel = 50 mA.)

Tensione

La tensione di partenza per un gel 1,5 millimetri

lastra collegato ad un alimentatore impostato a 25 mA

è solitamente da 80 a 90 V (utilizzando la SE 600

con un sistema discontinuo tampone Laemmli per

SDS gel). La tensione ﬁnale può variano tipicamente

220-400 V, a seconda della lunghezza del gel. (Vedi

Tabella 2).

Nota: tutti i modelli della serie

SE600 usare le piastre larghe

18 cm. Lo spessore gel deter-

mina la sezione trasversale (e

requisito corrente). La lunghe-

zza della piastra determina il

tempo di esecuzione.

Tabella 2: sistema tampone

Laemmli punto di partenza le

linee guida

Gel di spessore* 1,5 mm

Corrente per gel

†

25 mA

corrente costante

Avvio di tensione

‡

80 – 90 V

tensione ﬁnale 220 – 250 V

* Gel più spessi o più sottili richiedono proporzi-

onalmente più o meno corrente. Per esempio,

un gel 0,75 mm, che è la metà dello spessore

di un gel 1,5 mm, richiede metà molta corrente,

o 12,5 mA.

†

La corrente deve essere moltiplicata per il

numero di gel. Ad esempio, se due panini sono

installati, i quattro gel richiedono quattro volte

tanto corrente. La corrente può essere aumentato

per velocizzare le piste se raffreddamento attivo

viene utilizzato e può essere diminuita per lenti

piste notte.

‡

A 25 mA per gel.

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